La expansión de las industrias de biodiesel ha dado lugar a un aumento en la producción de glicerol residual, ahora considerado como parte del flujo de residuos, con los costos asociados a la refinación y eliminación derivadas de su contenido en impurezas. Las tecnologías microbianas de microorganismos beneficiosos se consideran como una de las bases del desarrollo sostenible y productividad de la agricultura. Por lo tanto, este proyecto está dirigido a evaluar el uso potencial del glicerol, residuo de la producción de biodiesel, como fuente alternativa de carbono y energía para el crecimiento y multiplicación de cócteles microbianos beneficiosos. El experimento implicó la activación, y luego la reproducción en una fase sólida, de dos fuentes de microorganismos, microorganismos eficientes (EM) y los microorganismos de montaña (MM). Las fuentes de carbono y energía fueron melaza (T1), melaza y glicerol residual combinado (T2) y glicerol residual (T3). En la fase de activación, se realizaron evaluaciones semanales durante cinco semanas de pH y CE, análisis NMP, patrones de crecimiento microbiano en tubos de ensayo y el conteo en caja Petri con medios de agar nutritivo para poblaciones microbianas. Se examinaron análisis similares en cuanto a la fase de activación, así como análisis de contenido de NH4+, NO3¯, C y N, para la fase sólida. Además, se analizaron parámetros físicos de color y olor de los productos finales. Se observaron variaciones estadísticas para valores de CE y pH. Los valores de pH obtenidos fueron T1 (3.5 a 4.5), T2 (4.0 a 5.0) y T3 (5.5 a 7.5) para todos los tratamientos. La CE estaba inversamente relacionada con valores de pH con la fuente de EM, pero no con la de MM. Se observaron diferencias estadísticas entre tratamientos para el análisis NMP, con los valores más altos obtenidos por el T2 para ambas fuentes microbianas. En la fase sólida, se observaron diferencias estadísticas entre los valores promedios para C y las concentraciones de NO3¯ pero no para las concentraciones de NH4+. Los microorganismos anaerobios fueron las especies dominantes con las densidades más altas, seguidas por los facultativos y los aerobios, con ambas fuentes microbianas. Las densidades microbianas finales obtenidas para la fase reproductiva sólida fueron 105 UFC/g a 106 UFC/g. El glicerol residual como cosustrato con melaza, durante la fase de activación, presentó los mayores valores promedios de NMP para poblaciones microbianas. Además, el glicerol residual fue más productivo en términos de población microbiana cuando se utilizó como sustrato principal en la fase sólida anaerobia en comparación con la fase líquida.