Examinando por Autor "Birungi, Fatumah"
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- ÍtemRestringidoAislamiento de ADN de tejido fresco y seco de diferentes especies de tubérculos.(Universidad EARTH, 2017-12) Birungi, Fatumah; Tamayo, Ana CristinaEn Uganda, los cultivos de raíces y tubérculos funcionan como alimento básico especialmente en el norte del país; su demanda está incrementando, pero sus rendimientos están disminuyendo por la sequía, altas temperaturas, enfermedades, entre otros. Por esta razón, la aplicación de técnicas biotecnológicas como la genética molecular, basado en el aislamiento de las moléculas de ADN, se convierte en una alternativa para lograr la seguridad alimentaria en el país, permitiendo así, aislar el ADN de buena calidad para poder desarrollar variedades que son resistentes y con altos rendimientos. Para esta investigación, se seleccionaron cinco especies; Ipomea batatas (camote), Colocasia esculenta (malanga), Dioscorea sp. (ñame), Xanthosoma sagittifolium (tiquizque) y Manihot esculenta (yuca) y se evaluaron tres variables; el protocolo CTAB de aislamiento de ADN con cuatro modificaciones, dos tipos de tejidos (hoja joven y raíz o tubérculo) y dos métodos de conservación (fresco y seco) con tres tratamientos: 1 (fresco), 2 (liofilizado) y 3 (seco al horno), con el fin de definir la influencia sobre la calidad y cantidad de ADN aislado. La electroforesis fue realizada en gel de agarosa (0.8 %) efectuando varias modificaciones derivadas de los resultados de cada prueba. La cuantificación se realizó mediante espectrofotometría de absorbancia a una longitud de onda de 260 nm y se obtuvo una estimación de la pureza de ADN a través de relación de absorbancia (A260 nm / A 280 nm). Como resultados, la cantidad promedio de ADN obtenido del tejido fresco y seco (liofilizado) fue de 1.899 μg/mL y 2.147 μg/mL respectivamente; la especie Manihot esculenta presentó mayor pureza; el protocolo CTAB modificado (4), en donde se agregaron 1000 µL de buffer para la maceración, dio resultados óptimos; el mejor método de conservación resultó ser, seco liofilizado y el tejido del tubérculo como el mejor para aislar el ADN. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos, se propone que el método de CTAB modificado (4), con el tejido foliar en estado fisiológico seco liofilizado, permite obtener ADN de óptima calidad y cantidad para ser utilizado en las investigaciones de la mejora de las especies de raíces y tubérculos.